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熒光分光光度計(jì)是一種常用的實(shí)驗(yàn)儀器,用于測(cè)量物質(zhì)的熒光強(qiáng)度和熒光光譜。在使用熒光分光光度計(jì)之前,需要對(duì)其進(jìn)行校準(zhǔn),以確保測(cè)量結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。本文將介紹一種常用的熒光分光光度計(jì)校準(zhǔn)方法。
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熒光分光光度計(jì)校準(zhǔn)
在測(cè)量之前,需要對(duì)熒光分光光度計(jì)進(jìn)行零點(diǎn)校準(zhǔn)。將熒光分光光度計(jì)的樣品池中注入純?nèi)軇?如去離子水或甲醇,確保熒光強(qiáng)度為零。根據(jù)熒光分光光度計(jì)的型號(hào)和使用說(shuō)明書(shū),進(jìn)行相應(yīng)的零點(diǎn)校準(zhǔn)操作。
完成零點(diǎn)校準(zhǔn)后,將樣品池中的標(biāo)準(zhǔn)溶液放入熒光分光光度計(jì)中進(jìn)行測(cè)量。在測(cè)量過(guò)程中,確保樣品池中的溶液均勻攪拌,以消除懸浮物或沉淀對(duì)測(cè)量結(jié)果的影響。
根據(jù)熒光分光光度計(jì)的測(cè)量結(jié)果,繪制熒光強(qiáng)度與標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度之間的曲線(xiàn)。這條曲線(xiàn)被稱(chēng)為熒光校準(zhǔn)曲線(xiàn),用于后續(xù)測(cè)量樣品的熒光強(qiáng)度轉(zhuǎn)換為濃度。
準(zhǔn)確性，可以重復(fù)上述操作，測(cè)量多次不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液，并繪制多條熒光校準(zhǔn)曲線(xiàn)。然后，可以通過(guò)擬合曲線(xiàn)的方法選擇校準(zhǔn)曲線(xiàn)，以減小測(cè)量誤差。
在實(shí)際測(cè)量樣品的熒光強(qiáng)度時(shí)，將樣品池中的待測(cè)樣品放入熒光分光光度計(jì)中進(jìn)行測(cè)量。根據(jù)熒光校準(zhǔn)曲線(xiàn)，可以將測(cè)量得到的熒光強(qiáng)度轉(zhuǎn)換為樣品的濃度。需要注意的是，在測(cè)量之前，需要對(duì)樣品進(jìn)行適當(dāng)?shù)奶幚?，以提取熒光物質(zhì)并消除其他干擾。
除了校準(zhǔn)曲線(xiàn)，熒光分光光度計(jì)還可以進(jìn)行其他校準(zhǔn)操作。例如,可以進(jìn)行儀器響應(yīng)校準(zhǔn)，即通過(guò)測(cè)量已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液，來(lái)確定熒光分光光度計(jì)的響應(yīng)系數(shù)。此外,還可以進(jìn)行熒光強(qiáng)度漂移校準(zhǔn),即定期測(cè)量已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液，以檢測(cè)儀器的長(zhǎng)期穩(wěn)定性和準(zhǔn)確性。
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